人腎損傷因子1（Kim-1）檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱：人腎損傷因子1（Kim-1）檢測試劑盒

英文名稱：Human Kim-1 ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：XFH12519

規(guī)格：48T/96T

儲存條件：2-8℃

有效期：6個月

檢測原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人腎損傷因子1（Kim-1）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人腎損傷因子1（Kim-1）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

注：標本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作安全須知：

1) 所有的化學(xué)試劑理應(yīng)被認為具有潛在危害,任何的操作都必須提前做好實驗防護。在操作試劑盒或處理樣本的區(qū)域請不要飲食。

2) 推薦只有經(jīng)過良好實驗室培訓(xùn)的工作人員方可操作本試劑盒。操作時請佩戴合適的防護設(shè)施，例如白大衣、實驗手套、安全眼鏡等。

3) 請不要讓試劑或樣本接觸皮膚、眼睛和粘膜等身體部位。如不慎接觸，請立即用大量清水清洗。

4) 試劑盒中的終止液為酸性溶液，在使用終止液時，請佩戴防護服，做好防護眼睛、手及面部等的措施。

5)檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照實驗室規(guī)定進行處置，嚴禁隨意丟棄。

6)試劑盒的液體組分中，含有防腐劑，可能引起皮膚過敏反應(yīng)，避免吸入煙霧或與皮膚接觸。底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護手套，實驗完成后徹底洗手。

僅供科研實驗用，不做其他用途！