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永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品時(shí)間:2023-02-01

簡(jiǎn)要描述:

產(chǎn)品名稱:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文名稱:hCMEC/D3
培養(yǎng)基:內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基:500mlECM+25mlFBS+5mlECGS+5mlP/S
形態(tài):上皮細(xì)胞樣,多角形,梭形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長(zhǎng),背景干凈,不產(chǎn)色素,無(wú)空泡
生長(zhǎng)條件:37℃;5%CO2+95%空氣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
儲(chǔ)存方式:液氮
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

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產(chǎn)品名稱:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

英文名稱:hCMEC/D3

培養(yǎng)基:內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基:500mlECM+25mlFBS+5mlECGS+5mlP/S

形態(tài):上皮細(xì)胞樣,多角形,梭形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長(zhǎng),背景干凈,不產(chǎn)色素,無(wú)空泡

生長(zhǎng)條件:37℃;5%CO2+95%空氣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

儲(chǔ)存方式:液氮

傳代方法

復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL*培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰霉0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰霉,加入5-6mL*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 

 

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