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人胚腎細胞

人胚腎細胞

產(chǎn)品時間:2023-02-01

簡要描述:

產(chǎn)品名稱:人胚腎細胞
英文名稱:293T
培養(yǎng)基:293T細胞專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS+2mM L-谷氨酰氨
形態(tài):上皮細胞樣,多角形緊密排列,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素,無空泡
生長條件:37℃;5%CO2+95%空氣
生長特性:貼壁生長
儲存方式:液氮
分離基物:胚腎;5型腺病毒及SV40轉化;女性
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

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產(chǎn)品名稱:人胚腎細胞

英文名稱:293T

培養(yǎng)基:293T細胞專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS+2mM L-谷氨酰氨

形態(tài):上皮細胞樣,多角形緊密排列,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素,無空泡

生長條件:37℃;5%CO2+95%空氣

生長特性:貼壁生長

儲存方式:液氮

分離基物:胚腎;5型腺病毒及SV40轉化;女性

應用領域:表達SV40大T抗原,可用于轉染和作為包裝細胞;用于瞬時轉染時可高表達AP融合蛋白。293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區(qū)的質粒可以復制。

傳代方法

復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL*培養(yǎng)基的離心管內,1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰霉0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰霉,加入5-6mL*培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。 

 

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