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產(chǎn)品更新僅供科研-人胚腎細(xì)胞
更新時(shí)間:2023-05-09   點(diǎn)擊次數(shù):262次

產(chǎn)品更新僅供科研-人胚腎細(xì)胞


傳代方法 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。


細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰-酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許-胰-酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰-酶,加入5-6mL完-全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐?全培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 


生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣; 

生長特性 貼壁生長 

存儲(chǔ)條件 液氮 

類型 貼壁生長 

安全等級(jí) 1 

形態(tài) 上皮細(xì)胞樣,短梭形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈 

分離基物 胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性 

應(yīng)用領(lǐng)域 表達(dá)SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞;用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染時(shí)可高表達(dá)AP融合蛋白。293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系,293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生,同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原,含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)??梢詮?fù)制。@2017 


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