α-淀粉-酶水溶液(1%)操作步驟
簡(jiǎn)介：
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，其原理是過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)乙二醇基氧化成二醛，醛基與雪夫氏溶液起反應(yīng)，使無色品紅結(jié)合成紅色反應(yīng)，沉著含糖原的細(xì)胞結(jié)構(gòu)上，標(biāo)本上所能顯紅色的糖類主要為多糖包括糖原、糖蛋白、粘多糖和糖脂等。該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。
PAS技術(shù)是可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)（如糖原、黏蛋白和糖蛋白）的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。PAS染色實(shí)驗(yàn)原理是胞漿內(nèi)存在糖原或多糖類物質(zhì)（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）經(jīng)過碘酸（periodicacid）氧化，轉(zhuǎn)變?yōu)槎┗–HO-CHO），與雪夫(Schiff)試劑中的無色品紅結(jié)合，形成紫紅色染料而沉積于細(xì)胞內(nèi)多糖所在處。該反應(yīng)稱為過碘酸-雪夫(PAS)陽性反應(yīng)，以前也稱為糖原染色。
α-淀粉-酶水溶液(1%)由α-淀粉-酶、磷酸鹽組成，其pH在5.3左右，主要用于糖原PAS染色之前切片處理。糖原消化時(shí)需要兩張相同的切片，脫蠟后一張切片用α-淀粉-酶水溶液(1%)處理，另一張僅用PBS或蒸餾水處理，然后兩張切片均用PAS法染色，消化后染色消失表明存在糖原。主要用于消化淀粉，鑒別黏液物質(zhì)（如黏蛋白和糖原）。該產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用作他用。
操作步驟（僅供參考）：
1、 兩張相同切片，二甲苯脫蠟，梯度乙醇入水。
2、 一張切片入37℃淀粉-酶溶液處理1 h。另一張不用淀粉-酶溶液處理，入水中1h作為對(duì)照。
3、 流水沖洗兩張切片各。
4、 進(jìn)行糖原PAS染色步驟
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