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DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒使用注意事項
更新時間:2020-04-15   點擊次數(shù):888次

DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒使用注意事項


DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一種適合于把DNA轉(zhuǎn)染到培養(yǎng)的真核細胞中的轉(zhuǎn)染試劑盒。

    
目前基于DEAE-dextran的細胞轉(zhuǎn)染方法有兩種,一種方法為把DNA和DEAE--dextran混合后加入到細胞中,另一種方法為先用DEAE?-dextran預(yù)處理細胞,然后再加入DNA。后一種方法是在前一種方法的基礎(chǔ)上經(jīng)過改進而產(chǎn)生的,對于一些細胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB細胞等,后一種方法可以增加細胞對DNA的攝入量,顯著改善轉(zhuǎn)染效果。氯奎的加入可以抑制溶酶體對外源DNA的降解,從而提高轉(zhuǎn)染效率。但對于具體的細胞、具體的培養(yǎng)條件,如需獲得更加理想的轉(zhuǎn)染效率,必須自行摸索上述各種轉(zhuǎn)染方法,找出優(yōu)化的轉(zhuǎn)染方法。


注意事項:
    
使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。
    
轉(zhuǎn)染前細胞必須處于良好的生長狀態(tài)。
    
試劑盒中各試劑均經(jīng)過無菌處理,可以直接使用。在細胞轉(zhuǎn)染過程中要嚴格注意無菌操作。
    
需自備用于洗滌的PBS或HBSS,以及用于稀釋10XPBS的無菌水。
    
稀釋或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用試劑盒中提供的10XPBS稀釋。
    
氯奎溶液對人體有害,請注意適當防護。
    
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

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