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大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒應(yīng)該怎么用?
更新時(shí)間:2018-06-06   點(diǎn)擊次數(shù):860次

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒應(yīng)該怎么用?

α腫瘤壞死因子(TNF α)是一種主要由巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子,并參與正常炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)。α腫瘤壞死因子在許多病理狀態(tài)下產(chǎn)生增多,包括敗血癥、惡性腫瘤、心臟衰竭和慢性炎性疾病。在重癥類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的血液及關(guān)節(jié)中都可發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子增多。是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的直接殺傷腫瘤作用zui強(qiáng)的生物活性因子之一。分為T(mén)NF-α,TNF-β兩種,TNF家族除這兩種外還發(fā)現(xiàn)約30種。

操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋。

360ng/L

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

180ng/L

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

90ng/L

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

45ng/L

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

22.5ng/L

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl, 然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
  • 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同 3。
  • 洗滌:操作同 5。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘。
  • 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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大鼠腫瘤壞死因子α相關(guān)產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)ELISA試劑盒
大鼠重肽鐵蛋白(FTH)ELISA試劑盒
大鼠周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA試劑盒
大鼠軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)ELISA試劑盒
大鼠軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)ELISA Kit
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 (TGF-β1) ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β(TGF-βR)ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體蛋白2(TFR2)ELISA試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)ELISA試劑盒
大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 
大鼠總甲狀腺激素(TT4)
大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3)
大鼠阻抑素(PHB)ELISA試劑盒
大鼠組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶1(HAT 1)ELISA試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒應(yīng)該怎么用?

 

 

 

 

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