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小鼠層粘蛋白(LN)elisa試劑盒基本信息
更新時間:2017-07-28   點擊次數(shù):951次

小鼠層粘蛋白(LN)elisa試劑盒的基本信息
 層粘連蛋白又稱板層素其分子量為805kD,由一個400kD的α鏈和兩條200kD左右的β鏈組成。它是構(gòu)成細胞間質(zhì)的一種非膠原糖,在肝內(nèi)主要由內(nèi)皮細胞及貯脂細胞合成,與膠原一起構(gòu)成基底膜的成分。其生物功能是細胞黏著于基質(zhì)的介質(zhì),并與多種基底膜成分結(jié)合,調(diào)節(jié)細胞生長和分化。
小鼠層粘蛋白(LN)elisa試劑盒操作方法簡介
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
購買我司elisa試劑盒可以提供免費代測服務(wù),客戶準備好樣本,上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費上門取樣服務(wù)。其他地區(qū)的客戶,樣本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時間為5到7個工作日提供原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù), 實驗操作步驟以及實驗所用儀器。

 

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