很多客戶在使用elisa試劑盒時(shí)候,會(huì)有疑問:為什么在elisa實(shí)驗(yàn)zui后要添加終止液?如果不加終止液可以么?會(huì)對(duì)結(jié)果有什么影響?
南京信帆生物為您解答:
不加終止液會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響.因?yàn)橛行┟复呋磻?yīng),隨時(shí)間變化很快,超過反應(yīng)時(shí)間后,底物顏色變化快,有時(shí)不同濃度的待測(cè)物的濃度差別會(huì)反映不出來;而且,加入底物后,OD值會(huì)比不加終止液時(shí)高.加入終止液后,OD值也會(huì)發(fā)生變化。
在檢測(cè)過程中酶和底物還在反應(yīng),這樣剛開始檢測(cè)的孔和后來的孔會(huì)有較明顯差別(時(shí)間不一致!)。
其次因?yàn)椋咏K止液后的顏色和沒有加終止液的顏色不一樣,這樣其zui大吸收波長(zhǎng)不一樣。如果你用說明書上的波長(zhǎng)檢測(cè),其顯然不是zui大吸收波長(zhǎng),其檢測(cè)的靈敏度差,不能zui準(zhǔn)確地反映濃度變化。